稻瘟病菌附着胞差异表达基因文库的构建方法

• 作者: 刘同宝 卢建平 林福呈
• 来源期刊: 植物病理学报
• 学科: 农学
• 关键词: 稻瘟病菌 附着胞 种移性差减杂交
• 年，卷（期）: 2006,（2）
• 所属期刊栏目: 细胞生物学、生理学、生物化学、分子生物学
• 页码范围: 129-134
• 页数: 6页
• 分类号: S435.111.41
• 字数: 3634字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0412-0914.2006.02.006

摘要

利用抑制性差减杂交方法构建了稻瘟病菌分生孢子接种24 h所形成的附着胞差异表达基因文库.采用复印胶片诱导稻瘟病菌附着胞形成,在孢子浓度为1.0×106个/mL时,附着胞的形成率达到96.5%.分别提取附着胞、菌丝和分生孢子RNA,反转录成cDNA并经Alu Ⅰ酶切、接头连接后,以附着胞cDNA片段为tester,菌丝及分生孢子cDNA为driver进行抑制性差减杂交,构建成差减文库.从文库中分离获得142个基因片段,通过RT-PCR方法鉴定其中的71个为差异表达基因,证实文库高效可靠.构建优质的稻瘟病菌附着胞差异表达基因差减文库,为深入了解附着胞形成过程中基因的表达及功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	卢建平	浙江大学生命科学学院	26	332	11.0	18.0
2	林福呈	浙江大学生物技术研究所	53	1022	20.0	31.0
3	刘同宝	浙江大学生命科学学院	1	6	1.0	1.0