EGFP和ALR融合基因表达载体构建及其在HeLa细胞中的表达

• 作者: 张继英 李玲 白雁 石玉涛 阿荣 马玉珍
• 来源期刊: 内蒙古师范大学学报（自然科学汉文版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 绿色荧光蛋白 肝细胞再生增强因子 融合基因
• 年，卷（期）: 2006,（3）
• 页码范围: 340-343
• 页数: 4页
• 分类号: Q819
• 字数: 2189字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-8735.2006.03.024

摘要

从人血液中提取总DNA,利用PCR技术扩增人肝细胞再生增生因子基因,将其插入表达载体pEGFP-C1的多克隆位点中,构建增强绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescence protein gene,EGFP)和人肝细胞再生增强因子(human augmenter of liver regeneration gene,ALR)融合基因表达载体pEGFP/ALR,并将其转染Hela细胞系,用含G418的DMEM/F12培养液筛选转基因细胞,然后利用PCR和聚丙烯酰胺凝胶电泳检测转基因细胞中ALR基因的存在及其表达,用荧光显微镜检测EGFP基因的表达.结果显示:得到了构建正确的EGFP和ALR融合基因表达载体;在转基因细胞中,PCR扩增得到1.7Kb的ALR条带,蛋白电泳得到57KD大小条带,与ALR和EGFP融合蛋白大小相符;荧光显微镜下观察到发绿色荧光的Hela细胞.在转基因细胞中,EGFP和ALR同时存在并表达,绿色荧光蛋白可作为报告基因指示目的基因的表达,从而简化了目的基因繁琐的检测手段.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马玉珍		46	122	6.0	9.0
2	张继英		13	12	2.0	2.0
3	白雁		14	30	3.0	4.0
4	李玲		11	24	2.0	4.0
5	石玉涛		16	30	3.0	4.0
6	阿荣		3	3	1.0	1.0