人脂联素基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

• 作者: 刘德敏 孙颖 张捷 杨莉丽
• 来源期刊: 天津医药
• 关键词: 胞间信号肽类和蛋白质类 克隆,分子 基因表达 大肠杆菌
• 年，卷（期）: 2006,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 148-150
• 页数: 3页
• 分类号: R5
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-9896.2006.03.002

摘要

目的:克隆人脂联素(adiponectin)基因,并在大肠杆菌宿主系统中高效表达出adiponectin蛋白进行鉴定.方法:从人皮下脂肪组织提取总RNA,确认其正确性后经RT-PCR扩增得到全长cDNA片段,此片段经纯化回收后克隆至pMD 18-T载体,经行DNA序列分析,进一步克隆构建到表达载体至pET-DEST 42中,用IPTG在大肠杆菌中诱导表达.结果:含重组adiponectin质粒的大肠杆菌经0.4 mmol/T的IPTG诱导6 h后有高表达.结论:adiponectin基因的克隆构建和在大肠杆菌中的表达获得成功.