林麝IL-2细胞因子的克隆、表达和纯化

• 作者: 岳碧松 徐柳 赖彬 邹方东
• 来源期刊: 四川动物
• 学科: 生物学
• 关键词: 林麝白介素-2 克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2006,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 713-717
• 页数: 5页
• 分类号: Q95
• 字数: 4123字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-7083.2006.04.010

摘要

用林麝( Moschus berezovskii)外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cells, PBMC)提取总RNA,RT-PCR扩增IL-2(interleukin-2, IL-2),连接pMD18-T载体后转化大肠杆菌,筛选阳性克隆并测序.然后将IL-2成熟肽编码序列连接到pGEX4T-1原核表达载体进行表达、纯化.结果表明林麝IL-2开放阅读框全长468 bp,编码155个氨基酸.序列分析表明,林麝IL-2及其受体结合域与水牛的高度保守,而在翻译后修饰的预测活性位点上和水牛的有所不同.IPTG诱导林麝IL-2蛋白表达,得到约41 kD的目标带;优化表达后,林麝IL-2表达含量达到了总蛋白量的25%.经GST亲和柱分离纯化,得到了约41 kD的单一目标带,这说明林麝IL-2基因的原核表达成功.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	岳碧松	生物资源与生态环境教育部重点实验室四川大学生命科学院	12	63	5.0	7.0
2	邹方东	生物资源与生态环境教育部重点实验室四川大学生命科学院	10	27	3.0	5.0
3	徐柳	生物资源与生态环境教育部重点实验室四川大学生命科学院	14	69	5.0	8.0
5	赖彬	生物资源与生态环境教育部重点实验室四川大学生命科学院	1	3	1.0	1.0