AZT对肝癌细胞端粒酶活性及相关蛋白表达的影响

• 作者: 何敏 张志勇 朱淼 李力 蒋玉艳 覃健 韦霄
• 来源期刊: 癌症
• 学科: 医学
• 关键词: 3′-叠氮脱氧胸苷 肝肿瘤 SMMC-7721细胞 端粒酶活性 拉曼光谱 蛋白芯片
• 年，卷（期）: 2006,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 543-548
• 页数: 6页
• 分类号: R735.7
• 字数: 5192字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-467X.2006.05.005

摘要

背景与目的:端粒酶抑制剂抑制端粒酶活性的机制十分复杂,可能涉及多个蛋白的共同作用.本研究通过3′-叠氮脱氧胸苷(3′azido-deoxythymidine,AZT)作用于人肝癌细胞SMMC-7721,比较AZT作用后癌细胞端粒酶活性及相关蛋白的变化,探讨AZT抑制端粒酶活性的可能机制.方法:利用噻唑蓝[3(4,5-demethylthiazole-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium-bromide,MTY]实验确定AZT作用的最佳作用时间和浓度;实时荧光定量端粒重复序列扩增法(real-time fluorescent quantitative TRAP assay,FQ-TRAP法)检测AZT作用后,SMMC-7721细胞端粒酶活性变化;用缺口末端标记技术(terminal deoxyribonucleotidyl transferse(TdT)-mediated biotin-16-dUTP nick-end labelling,TUNEL)法和流式细胞术检测AZT作用后,SMMC-7721细胞凋亡情况;单细胞激光拉曼光谱技术和蛋白质芯片-飞行时间质谱仪,检测AZT作用后特异蛋白质的变化.结果:AZT抑制癌细胞生长的最佳作用时间为48 h,最佳作用浓度为20 mmol/L;FQ-TRAP法检测发现,AZT作用后肝癌细胞端粒酶活性与对照组相比受到明显抑制(P=0.0001);TUNEL法观察到AZT诱导肝癌细胞凋亡形态学改变,流式细胞术检测AZT诱导肝癌细胞凋亡率为13.5%;单细胞激光拉曼光谱技术观察到,AZT作用后有7个与蛋白代谢相关的特征峰变化;蛋白质芯片-飞行时间质谱仪检测发现,AZT作用后有24个蛋白分子在癌细胞中高表达,8个蛋白分子在癌细胞中低表达,32个差异蛋白均属于小分子蛋白.结论:AZT可抑制SMMC-7721细胞端粒酶活性,诱导凋亡与相关特异小分子蛋白有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何敏	广西医科大学医学科学实验中心	115	586	12.0	17.0
2	张志勇	广西医科大学公共卫生学院环境卫生学教研室	135	815	15.0	20.0
3	覃健	广西医科大学公共卫生学院环境卫生学教研室	57	273	9.0	13.0
4	李力		25	72	5.0	7.0
5	韦霄	广西医科大学公共卫生学院环境卫生学教研室	13	61	4.0	7.0
6	朱淼	广西医科大学医学科学实验中心	6	100	5.0	6.0
7	蒋玉艳	广西医科大学公共卫生学院环境卫生学教研室	3	20	2.0	3.0