用于库-库筛选体系的抗原表达载体的构建

• 作者: 王琰 高荣凯
• 来源期刊: 生物化学与生物物理进展
• 学科: 生物学
• 关键词: 库-库筛选 抗原 表达载体 选择感染性噬菌体
• 年，卷（期）: 2006,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 282-286
• 页数: 5页
• 分类号: Q7
• 字数: 2813字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3282.2006.03.012

摘要

选择感染性噬菌体(SIP)技术是研究蛋白质相互作用的良好手段,体内SIP技术在理论上适于库-库筛选,而双载体共包装聚合噬菌体方式是一条有效途径.为构建适合库-库筛选的抗原表达载体,选用TG10载体作为基本载体进行改造,首先克隆噬菌体M13基因间隔区的序列插入TG10中得到质粒pTMI,克隆基因Ⅲ的N1N2区序列,并在其3'端加上一段G4T柔性多肽,将NIN2插入到pTMI载体中Lac启动子的下游得到pTMIN,化学合成Ptrc启动子序列替换pTMIN中的Lac启动子及部分功能基因序列,构建成抗原表达载体pTTMIN,化学合成c-myc的十肽表位插入到G4S后进行融合表达,采用ELISA和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测抗原的表达,结果显示抗原得到了融合表达.用抗体呈现载体对pTTMIN性能进行鉴定,结果表明抗原表达载体可以与抗体呈现载体高效的共包装.综合以上结果说明抗原表达载体构建成功,可望用于库-库筛选体系.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王琰	海军总医院中心实验科	59	302	9.0	14.0
2	高荣凯	海军总医院中心实验科	20	60	5.0	7.0