重组N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶的高效表达与纯化

• 作者: 姚忠 李环 陈悦 韦萍
• 来源期刊: 生物加工过程
• 学科: 生物学
• 关键词: N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶 基因工程菌 亲和层析 纯化
• 年，卷（期）: 2006,（4）
• 所属期刊栏目: 研究与开发
• 页码范围: 56-60
• 页数: 5页
• 分类号: Q55
• 字数: 4029字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-3678.2006.04.012

摘要

利用质粒pET-22b(+)为表达载体,成功构建了高效表达N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶的基因工程菌BL21-pET-22b(+)-argE.研究了该菌的最适超声破壁条件及硫酸铵分级沉淀的最适范围,并以金属螯合亲和层析法纯化含有6-His-Tag的目的蛋白.结果表明:26 ℃诱导表达的菌体,最佳超声破碎条件为功率200 W,超声时间为15 min;目的蛋白主要存在于40%～50%硫酸铵沉淀中.通过Ni-NTA亲和层析柱纯化目的蛋白,可以达到SDS-PAGE电泳纯,并显示单亚基相对分子质量为43 000.纯化倍数为139倍,回收率为11.1%.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	韦萍	南京工业大学制药与生命科学学院	359	3120	25.0	38.0
2	姚忠	南京工业大学制药与生命科学学院	74	446	11.0	16.0
3	李环	南京工业大学制药与生命科学学院	39	236	8.0	13.0
4	陈悦	南京工业大学制药与生命科学学院	20	292	8.0	17.0