单纯疱疹病毒Ⅰ型糖蛋白D在酵母中的表达

• 作者: 姬秋彦 彭正华 徐维明 李健峰 李智华 龙海亭
• 来源期刊: 中国病毒学
• 学科: 医学
• 关键词: 单纯疱疹病毒 包膜糖蛋白D 毕赤酵母表达 纯化
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 6-10
• 页数: 5页
• 分类号: R373
• 字数: 4120字
• 语种: 英文

摘要

从提取的HSV-1基因组中扩增得到编码gD蛋白胞外区1～314aa的基因gDt,将其插入毕赤酵母表达质粒pPIC9K的醇氧化酶(AOX1)启动子下游,构建携带gDt的重组载体,经电转化GS115菌株和G418筛选,得到了高效分泌表达gD蛋白的毕赤酵母菌株,表达量达到250mg/L,该目的蛋白可被gD单抗(1-I-9)特异性识别.表达产物经离子交换、金属螯合、分子筛柱层析纯化后得到纯度较高的重组蛋白.重组gD蛋白免疫BALB/c小鼠可诱生一定水平的特异性抗体,表明该蛋白具有较好的免疫原性,能够诱导小鼠产生体液免疫应答.