腺病毒载体介导密码子优化型HPV 16 L1基因在哺乳动物细胞中的高效表达及病毒样颗粒的装配

• 作者: 吴小兵 周玉柏 周玲 曾毅
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 医学
• 关键词: 腺病毒 人乳头瘤病毒16型 密码子优化 病毒样颗粒
• 年，卷（期）: 2006,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 101-106
• 页数: 6页
• 分类号: R373
• 字数: 4848字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-8721.2006.02.005

摘要

为研究重组腺病毒载体作为HPV16预防性疫苗的可行性,构建了含密码子优化型HPV 16 L1基因的重组腺病毒,并对优化基因在哺乳动物细胞中的表达进行研究.首先按照哺乳动物密码子偏好对野生型HPV16 L1基因进行改造并合成优化基因,命名为mod.HPV16L1.将mod.HPV16L1基因克隆到穿梭质粒PDC316上,与骨架质粒共转染293细胞,在细胞内包装重组腺病毒rAd-mod.HPV16L1.用免疫印迹法检测病毒感染的293T细胞中HPV16L1蛋白的表达.通过Optiprep密度梯度超速离心法纯化HPV16 L1病毒样颗粒(VLPs).用磷钨酸负染,在电子显微镜下观察HPV16 L1蛋白自我装配形成的VLPs.结果显示,重组腺病毒载体可介导mod.HPV16 L1基因在哺乳动物细胞内的高效表达,L1蛋白可自我装配形成VLPs.