本生烟组织培养及遗传转化体系的建立

• 作者: 崔海涛 时呈奎 李向东 李春霞 王红艳 竺晓平 陈红运
• 来源期刊: 山东科学
• 学科: 农学
• 关键词: 本生烟 组织培养 MS培养基 实时荧光PCR
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 页码范围: 23-27
• 页数: 5页
• 分类号: S572.035.3
• 字数: 3523字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-4026.2006.01.006

摘要

本文研究了通过农杆菌侵染获得本生烟(Nicotiana benthamiana)转基因植株的方法.将本生烟中上部叶片消毒后切成5mm×5mm左右的小块作为外植体,在含有6-BA(3mg/L)和NAA(0.2mg/L)的MS培养基中培养2～3d,用含有表达载体的农杆菌侵染后共培养3～4d,转入含有6-BA(3mg/L)、NAA(0.2mg/L)和卡那霉素(100mg/L)的MS培养基中培养2～3周.将外植体边缘产生的愈伤组织和芽点转移到只含有卡那霉素(100mg/L)的MS培养基中继续培养,2周后分化出大量不定芽.继续培养2周,当芽长1～3cm时,将芽转移到含IBA(0.1mg/L)的MS培养基中分化生根,得到再生植株.当再生植株高8～10cm、根长4～5cm以上时,移栽到经过灭菌的营养土中.通过实时荧光PCR扩增,从获得的植株中检测35S启动子和NOS终止子外源基因片段,判定所得的植株的确为转基因植株.最后对本生烟组织培养中应该注意的问题进行了讨论.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李向东	山东农业大学植物保护学院	124	1944	23.0	41.0
2	竺晓平	山东农业大学植物保护学院	63	731	16.0	24.0
3	王红艳	山东农业大学植物保护学院	13	168	5.0	12.0
4	时呈奎	山东农业大学植物保护学院	14	115	6.0	10.0
5	李春霞	山东农业大学植物保护学院	3	31	2.0	3.0
6	崔海涛	山东农业大学植物保护学院	3	31	2.0	3.0
7	陈红运	国家质检总局动植物检疫实验所	6	346	5.0	6.0