腺相关病毒Rep78蛋白抑制乙型肝炎病毒复制的体外研究

• 作者: 丛敏 刘天会 刘晓明 唐淑珍 尤红 王宝恩 王萍 贾继东
• 来源期刊: 肝脏
• 学科: 医学
• 关键词: 腺相关病毒 Rep78 乙型肝炎病毒
• 年，卷（期）: 2006,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 396-398
• 页数: 3页
• 分类号: R5
• 字数: 2781字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-1704.2006.06.007

摘要

目的 研究腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)Rep78蛋白对乙型肝炎病毒(HBV)复制的抑制作用及机制.方法 将土拨鼠肝炎病毒(WHV)全基因组DNA从质粒中酶切回收,线状DNA重新连接呈环状.用脂质体Fugene 6体外转染至HepG2细胞,同时共同转染含有Rep78的质粒AAVdl52-91.5 d后收获细胞DNA,Southern blot检测WHV DNA复制.以含有HBV全长的质粒为模板,PCR法分别扩增出HBV-S、C和X基因全长.以凝胶电泳阻滞实验(EMSA)检测Rep78与HBV-S、C和X的结合.结果 Southern blot结果表明,AAV-Rep78可以明显抑制WHV病毒在HepG2细胞中的复制,并呈剂量依赖关系.EMSA结果显示,Rep78蛋白在体外能够与HBV-S、C和X的DNA结合,其中与HBV-C的结合最强而且有剂量依赖关系.此外,这种Rep78蛋白与HBV-C DNA结合可以被特异性的Rep78抗体阻滞,形成超结合带.结论 AAV-Rep78可以抑制HBV DNA的复制,其机制可能在于Rep78蛋白结合并抑制了HBV-C基因.