治疗糖尿病的短肽药物GLP-1在毕赤酵母中的分泌表达

• 作者: 于雷 侯建华 方园园 李明刚 杨少辉 杨立泉 王翠艳 薄涛
• 来源期刊: 生物学通报
• 学科: 医学
• 关键词: 糖尿病 胰高血糖素样肽-1 毕赤酵母 短肽 分泌表达
• 年，卷（期）: 2006,（4）
• 所属期刊栏目: 实验与技术
• 页码范围: 44-47
• 页数: 4页
• 分类号: R5
• 字数: 4797字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0006-3193.2006.04.025

摘要

利用毕赤酵母表达治疗糖尿病的短肽药物GLP-1(胰高血糖素样肽-1).以pUC18GLP-1为模板进行PCR,将获得的GLP-1基因片段克隆到pMD18T-vector上,然后将SmaI和NotI双酶切获得的基因小片段插入到表达载体pPIC9上,完成表达载体pPIC9GLP-1的构建,SacI线性化重组质粒,通过醋酸锂转化法转化毕赤酵母GS115感受态细胞,成功构建了能够分泌抗二肽酶Ⅳ降解的长效促胰岛素激素的毕赤酵母工程菌株.结果表明毕赤酵母6号菌株的GLP-1分泌表达产量最高可达100.00mg/L,实现了GLP-1在毕赤酵母中的表达,为进一步开发治疗糖尿病新型短肽药物的研究奠定了基础.