拟南芥psy基因cDNA的克隆及其植物表达载体的构建

• 作者: 丛玲 何光源 姚琴 杨广笑 汪越盛 罗立廷 陈明洁
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 八氢番茄红素合成酶 RT-PCR 植物表达载体 菌落PCR
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 5-7
• 页数: 3页
• 分类号: Q785|Q782
• 字数: 2527字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-311X.2006.01.003

摘要

为了获得胚乳组织特异性表达八氢番茄红素的转基因小麦,以拟南芥幼叶RNA为模板,由特异型引物通过RT-PCR一步法得到大小约为1.3kb的基因片段,将此片段连接在克隆载体pMD18-T进行测序,结果表明,该基因片段为八氢番茄红素合成酶基因(psy)cDNA片段.将psy基因片段正向插入植物表达载体pLRPT中高分子量麦谷蛋白亚基基因1Dx5启动子与nos终止子之间,pLRPT载体无1Dx5基因开放阅读框,运用菌落PCR对重组子进行筛选与鉴定,说明拟南芥psy基因已正确插入pL-BPT,成功构建了植物表达载体pLRPTPSY.