应用表达载体介导siRNA抑制胰腺癌STAT3基因表达的研究

• 作者: 刘俊 张巨峰 张放 曹俊 李惠明 江弢 裘正军 黄克俭 黄陈
• 来源期刊: 胰腺病学
• 学科: 医学
• 关键词: RNA干扰 STAT3 胰腺肿瘤
• 年，卷（期）: 2006,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 226-229
• 页数: 4页
• 分类号: R73
• 字数: 2755字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1674-1935.2006.04.010

摘要

目的 探讨表达载体介导小干扰RNA(siRNA)对人胰腺癌细胞系SW1990转录激活因子-3(STAT3)表达的抑制作用.方法 设计合成3种可编码后形成小发夹结构针对STAT3基因的siRNA的DNA序列,将其连入pRNAT-U6.1/Neo质粒中,构建STAT3 siRNA表达载体.表达载体进行PCR及测序鉴定,并分别转染SW1990细胞,实时定量PCR和Western blot观察SW1990细胞转染后STAT3 mRNA和蛋白表达的改变.结果 PCR和DNA测序证实携带3种STAT3 siRNA表达载体构建成功,分别转染SW1990细胞后,STAT3基因的mRNA和蛋白表达量与空质粒转染相比均明显下降(P＜0.05),其中,第二种STAT3 siRNA作用明显,可使mRNA和蛋白表达水平分别下降63%和60%.结论 本研究构建的STAT3 siRNA表达载体可有效抑制SW1990细胞STAT3的mRNA和蛋白表达,为下一步以STAT3为靶点的胰腺癌基因治疗实验研究奠定了基础.