大鼠椭圆囊感觉上皮细胞的原代培养及其意义

• 作者: 刘俊 孔维佳 张丹 张亚民
• 来源期刊: 中华耳科学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 椭圆囊 感觉上皮 原代培养 再生 毛细胞
• 年，卷（期）: 2006,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 123-128
• 页数: 6页
• 分类号: Q344|Q437
• 字数: 5637字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-2922.2006.02.010

摘要

目的建立大鼠椭圆囊感觉上皮细胞(utricular sensory epithelial cell,USEC)的原代培养体系,为研究毛细胞再生机制提供大量来源一致的细胞.方法取出生1天(postnatal day 1,P1)大鼠的椭圆囊感觉上皮,嗜热菌蛋白酶(thermolysin)消化处理,获得纯椭圆囊感觉上皮,再采用消化法进行原代培养,培养基为DMEM.从第2天开始每日用倒置显微镜观察、照相,对USEC的形态、生长特征进行观察;透射电镜观察;应用细胞角蛋白18及波形蛋白免疫细胞化学方法鉴定USEC来源;应用免疫细胞化学及RT-PCR分别检测毛细胞的特征性标志物calretinin、Brn3.a和AChR α9、myosin Ⅶa mRNA的表达.结果原代培养USEC呈扁平、多角形、核大而圆的上皮细胞形态,细胞之间连接紧密,形成单层时呈"铺路石样"外观,可见由成百个USEC包绕液体而成的dome.原代USEC表达细胞角蛋白,不表达波形蛋白,微绒毛丰富,细胞间连接紧密,提示其上皮起源;表达毛细胞的特征性标志物Brn3.a、calretinin及AChR α9、myosin Ⅶa mRNA,表明培养USEC具有毛细胞前体细胞的特征.结论原代培养的USEC表达毛细胞的特征性标志物,具有毛细胞前体细胞的特征.USEC原代培养体系的建立,为进一步探讨毛细胞再生的机制提供充足的细胞来源.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孔维佳	武汉华中科技大学同济医学院附属协和医院耳鼻喉科	5	27	3.0	5.0
2	刘俊	武汉华中科技大学同济医学院附属协和医院耳鼻喉科	1	1	1.0	1.0
3	张丹	武汉华中科技大学同济医学院附属协和医院耳鼻喉科	1	1	1.0	1.0
4	张亚民	武汉华中科技大学同济医学院附属协和医院耳鼻喉科	1	1	1.0	1.0