SARS-CoV N蛋白与人冠状病毒HCoV-OC43和HCoV-229E的交叉反应表位及特异表位的确定

• 作者: 周为民 夏宁邵 张相民 张陵林 王慧娟 谭文杰 闫克夏 阮力
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 医学
• 关键词: SARS-CoV HCoV-OC43 HCoV-229E N蛋白 抗原表位
• 年，卷（期）: 2006,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 248-255
• 页数: 8页
• 分类号: R373.1
• 字数: 5817字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-8721.2006.04.002

摘要

为确定SARS-CoV N蛋白的特异抗原表位,对3种人冠状病毒SARS-CoV、HCoV-OC43和HCoV-229E N蛋白之间的交叉免疫反应进行了系统研究.构建了分别表达SARS-CoV、HCoV-OC43和HCoV-229E N蛋白的重组痘苗病毒,并制备了相应的小鼠免疫血清.用间接免疫荧光方法,检测了3种N蛋白的表达及其与3种冠状病毒免疫动物血清和SARS病人恢复期血清之间的反应.与此同时,用Western blot方法分析了原核表达的39个不同区段的SARS-CoV N蛋白与3种冠状病毒动物免疫血清和SARS病人恢复期血清之间的交叉反应性.免疫荧光检测结果表明,SARS-CoV、HCoV-OC43和HCoV-229E3种病毒的N蛋白在重组痘苗病毒感染的HeLa细胞中均可以特异表达;3种N蛋白之间存在明显交叉免疫反应.Western blot结果显示,SARS-CoV N蛋白的表位主要位于30～60aa、170～184aa、301～320aa和360～422aa;与HCoV-OC43的交叉反应表位主要位于30～60aa、90～120aa、204～214aa和320～360aa;与HCoV-229E的交叉反应表位主要位于30～60aa、150～160aa和301～360aa.含SARS-CoV N蛋白特异表位的重组肽N155b(60～214aa)和N185(30～214aa)只与SARS病人恢复期血清和灭活SARS-CoV免疫小鼠的血清反应,而不与灭活HCoV-OC43和HCoV-229E免疫的山羊血清产生交叉反应.上述结果为使用SARS-CoV N蛋白抗原进行特异诊断试剂的研究,提供了重要的实验依据.