大鼠视网膜色素上皮细胞系载脂蛋白基因表达与脂质合成和分泌

• 作者: Christine A.Curcio Chuan-Ming Li Martin Rudolf 刘杏 彭大伟 曾淑君 王岚
• 来源期刊: 眼科学报
• 学科: 医学
• 关键词: 视网膜色素上皮细胞 RPE-J 脂蛋白 载脂蛋白 脂质 光感受器细胞 基因
• 年，卷（期）: 2006,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 244-251
• 页数: 8页
• 分类号: R3
• 字数: 5503字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4432.2006.04.009

摘要

目的:检测大鼠视网膜色素上皮细胞系(RPE-J)是否表达载脂蛋白的基因及其是否具有合成和分泌中性脂质的功能.方法:将RPE-J细胞培养于组织培养板及TransweⅡ上,用RT-PCR检测载脂蛋白mRNA的表达.将荧光标记颗粒加入细胞中培养以检测细胞吞噬功能.细胞中加入光感受器细胞外节,培养不同时间点后提取脂质,用薄层层析法和酶学荧光法分析细胞中脂质含量及变化.用放射性标记的Oleic Acid([3H]-oleate)检测细胞新合成和分泌中性脂质的功能.结果:RPE-J细胞有载脂蛋白A-Ⅰ,A-Ⅱ,B,E,C-Ⅰ,C-Ⅱ,C-Ⅲ,以及微粒体甘油三酯酸转移蛋白基因的表达.RPE-J细胞具有吞噬功能.吞噬光感受器细胞外节后,RPE-J细胞中甘油三酯含量增加5.8倍,磷脂含量增加2.6倍,非酯化胆固醇增加1.5倍,酯化胆固醇增加0.3倍.RPE-J细胞和培养基内可以检测到新合成的放射标记的中性脂质.细胞内脂质含量随时间延长而增加:培养基中只有磷脂随时间延长而增多.结论:RPE-J细胞有多种载脂蛋白及微粒体甘油三酯酸转移蛋白的基因表达.吞噬光感受器细胞外节后,RPE-J细胞中脂质增加.培养基中加入长链脂肪酸后,RPE-J细胞可以新合成和分泌中性脂质.