激光捕获技术在心房细胞定位分离中的应用

• 作者: 任付先 欧妍 牛小麟 陈伟 黄辰
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 激光捕获 心脏 RNA RT-PCR
• 年，卷（期）: 2006,（3）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 467-470
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 3379字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-173X.2006.03.035

摘要

目的探索激光捕获显微切割技术(laser capture microdissection, LCM)定位分离心房细胞,并对提取的微量RNA进行β-actin 及 GAPDH 基因扩增.方法首先验证预做LCM样品的完整性,然后常规制备冰冻切片,采用改进的HE快速染色脱水法染色,提取刮片组织的RNA验证其质量,确保在切片染色过程中RNA的完整性.最后进行LCM分离纯化心房细胞,通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增β-actin 及 GAPDH 基因.结果经快速HE染色心房细胞形态学清晰;预做LCM的样品和染色后组织刮片可提取出高质量的RNA,紫外分光光度计测定吸光度值A 260/A 280为1.9～2.0之间.甲醛变性凝胶电泳显示清晰的28S rRNA和18S rRNA条带;捕获细胞提取的微量RNA经RT-PCR后进行凝胶电泳显示有300 bp及357 bp的扩增条带.结论 LCM可以分离出纯度较高的心房细胞,提取的微量RNA可以扩增出管家基因β-actin和GAPDH.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄辰	西安交通大学环境与疾病相关基因教育部重点实验室	53	336	8.0	16.0