中华管鞭虾(Solenocera crassicornis)蛋白酶的纯化及其生化特性研究

• 作者: 何雄 徐大伦 杨文鸽 潘云娣 薛长湖 陈士国
• 来源期刊: 海洋与湖沼
• 学科: 生物学
• 关键词: 中华管鞭虾 蛋白酶 纯化 生化特性
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 页码范围: 47-52
• 页数: 6页
• 分类号: Q55
• 字数: 4127字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0029-814X.2006.01.008

摘要

采用Tris-HCl缓冲液(50mmol/L, pH7.5)抽提、Q-sepharose F.F.阴离子交换层析、Sephacryl S-300凝胶过滤层析、SDS-PAGE等方法,进行中华管鞭虾虾头蛋白酶的分离纯化、酶学性质及其动力学特性的研究.结果表明,中华管鞭虾虾头蛋白酶粗提物经层析后,得到聚丙烯酰胺凝胶电泳纯的一酶组分.该蛋白酶的比活力从359.39U/mg增加到8277.83U/mg,提高了23.03倍,回收率达37.69%,SDS-PAGE显示该蛋白酶只含一条谱带,相对分子量为24.50kDa.以偶氮酪蛋白作为底物,该酶的米氏常数Km值为0.28mg/ml,最适温度为55℃,最适pH为7.5;蛋白酶在60℃以下比较稳定,放置1h后活性仍保持在60%以上,而在60℃以上时蛋白酶活性急剧下降,80℃放置1h后,酶活性只残留21.32%.10mmol/L Cu2 +、Zn2 +和EDTA对该蛋白酶有较强的抑制作用,抑制率分别约为97%、96%和55%,10mmol/L Mg2 +能显著促进蛋白酶活性,而10mmol/L Fe2 +、Ba2 +、Ca2 +对蛋白酶活性的影响不大.推测中华管鞭虾蛋白酶可能为一种金属蛋白酶.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	薛长湖	中国海洋大学生命科学与技术学部	475	6355	39.0	54.0
2	杨文鸽	宁波大学生命科学与生物工程学院	194	2879	27.0	40.0
4	陈士国	中国海洋大学生命科学与技术学部	9	201	8.0	9.0
7	徐大伦	宁波大学生命科学与生物工程学院	113	1653	21.0	34.0
8	何雄		46	205	8.0	12.0
9	潘云娣	宁波大学生命科学与生物工程学院	10	185	9.0	10.0