10-23 DNA enzyme对乙型肝炎病毒C基因体外转录产物的切割活性

• 作者: 侯伟 刘克洲 李敏伟 沃健儿
• 来源期刊: 浙江大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: DNA催化性 DNA 单es,链 肝炎病毒,乙型/遗传学 基因组,病毒/遗传学 重组,遗传 转染
• 年，卷（期）: 2006,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 507-511
• 页数: 5页
• 分类号: R512.62
• 字数: 2897字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2006.05.008

摘要

目的:探讨10-23 DNA enzyme对乙型肝炎病毒C基因体外转录产物的特异切割活性.方法:设计并合成3种能针对乙型肝炎病毒C基因开放阅读框A1816UG的特异性脱氧核酶,分别命名为DrzBC-7、DrzBC-8和DrzBC-9.应用体外转录的方法获得相应的底物RNA,观察DrzBC-7、DrzBC-8和DrzBC-9对其的体外切割效应.以DrzBC-9为例,观察不同浓度的MgCl2对体外切割效率的影响,根据Lineweaver Burk作图法,计算相关的酶动力学参数Km、Kcat和Kcat/Km.结果:通过体外转录获得用于切割反应的底物RNA,其大小为300 nt.在特定的切割条件下,DrzBC-7、DrzBC-8和DrzBC-9均能对相应的底物RNA进行有效的切割,切割产物分别为109 nt和191 nt.以DrzBC-9为例,在切割反应体系中缺乏MgCl2时,未见有切割反应.MgCl2浓度在150 mmol·L-1时达到最高切割效率,再提高MgCl2的浓度,切割效率未见明显增大.酶动力学参数Km、Kcat和Kcat/Km分别为1.4×10-9 mol·L-1,1.6 min-1和 1.1×109 mol·L-1·min-1.结论:针对乙型肝炎病毒C基因的10-23 DNA enzyme在体外对相应的转录产物有特异切割作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	侯伟		1	3	1.0	1.0
2	沃健儿		1	3	1.0	1.0
3	刘克洲		1	3	1.0	1.0
4	李敏伟		1	3	1.0	1.0