将IL-2基因构建到叶绿体转化载体并转入烟草

• 作者: 刘蔼民 吴光南 张大栋 朱鑫泉 汤日圣 沙钟瑞 童红玉 黄益洪
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 烟草 叶绿体转化 壮观霉素 人白细胞介素2基因
• 年，卷（期）: 2006,（4）
• 页码范围: 379-383
• 页数: 5页
• 分类号: S5
• 字数: 4670字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4440.2006.04.012

摘要

以人白细胞介素2(IL-2)基因为目的基因,烟草accD和ORF184同源序列为侧翼引导序列构建成烟草叶绿体转化载体pAIL.以大烟草NC89为转化受体,通过基因枪方法对烟草叶片进行轰击转化.轰击参数为:每枪0.6 μm的金粉300～500 μg,轰击距离6 cm,真空度9.48×104 Pa.在500 mg/L的壮观霉素筛选压下,经约30 d的筛选分化,逐渐产生绿色的抗壮观霉素芽或愈伤,目前已获得31株(丛)抗性芽及8块抗性愈伤.用IL-2基因的PCR引物对4株较大的小苗进行检测,初步证明3株为转基因植株.