高亲和力单克隆抗体CL15识别的表位

• 作者: 叶萍 吕良敬 张宇杲 杨程德 王元 陈晓翔 陈顺乐 顾越英
• 来源期刊: 现代免疫学
• 学科: 医学
• 关键词: 表位 生物信息学 纤溶酶 抗磷脂综合征
• 年，卷（期）: 2006,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 297-301
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 2708字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-2478.2006.04.008

摘要

鉴定抗磷脂综合征患者来源的抗纤溶酶单抗CL15所识别的结构域,并运用生物信息学和计算机辅助设计对CL15进行表位分析.使用分子克隆的方法克隆并纯化了纤溶酶的结构域,ELISA方法检测CL15对天然纤溶酶和微小纤溶酶的结合能力.根据CL15的抗体的互补区(CDR)的已知序列,在PBD蛋白库中进行同源比较,获得了同源性较高的单抗1MFA的Fab段的晶状结构,用计算机软件把CL15的CDR区序列优化进入1MFA后,根据结构域的空间结构与CL15进行对接.结果,高亲和力结合纤溶酶的单抗CL15识别纤溶酶的结构域,通过对CL15的晶体结构的同源模建,计算机模拟与微小纤溶酶结合,CL15在纤溶酶的酶活性区的606～789中的部分氨基酸序列有明显的相互作用,存在表位为空间构象,能将纤溶酶的丝氨酸活化中心屏蔽.CL15能识别微小纤溶酶,抗原表位在纤溶酶的丝氨酸的活性中心区域.CL15能阻断丝氨酸蛋白酶的活性中心的关键氨基酸,降低纤溶酶的活性,可能是最终导致抗磷脂综合征病人血栓形成的原因之一.