多表位hCG嵌合肽(CP1和CP10)抗原的构建及其免疫原性

• 作者: 何亚萍 季朝能 廖矛川 徐万祥 洪爱真 谢毅 邱德义 陈金中 顾少华
• 来源期刊: 分子细胞生物学报
• 学科: 医学
• 关键词: 人毛膜促性腺激素β亚单位 嵌合肽免疫原 原核表达 纯化 免疫应答
• 年，卷（期）: 2006,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 414-422
• 页数: 9页
• 分类号: R3
• 字数: 5865字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-520X.2006.05.004

摘要

本研究设计了CP1和CP10两种嵌合肽免疫原,它们由人绒毛膜促性腺激素β亚单位(β-hCG)3个线性B细胞表位(BCE)以及包括来自乙肝表面抗原和破伤风类毒素2个广谱性T细胞表位(TCE)的6个TCEs组合而成.编码CP1及其衍生物CP10的人工基因分别重组插入热诱导pBV221载体后,均能在大肠杆菌中以约占细菌总蛋白1%的比例被表达.在蛋白印迹试验中,在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳凝胶上显示约为16.5 kD分子量的CP1和CP10表达蛋白,能被抗各插入表位单克隆或多克隆抗体识别.各表达蛋白可用制备性PAGE方法一步纯化,纯化产物均显示95%以上的电泳均一性,纯化得率可达到每升培养液1-2mg水平.以它们为抗原主动免疫小鼠,都能分别产生识别CP1或CP10和天然β-hCG的抗血清,并都能在它们的抗血清中检测到各插入抗原表位的抗体.hCG CPs的可获得性及其能诱导各表位抗体生成特征,有可能成为研制hCG抗生育和肿瘤治疗性疫苗的新的候选免疫原.