用昆虫细胞表达系统表达人组织激肽释放酶原

• 作者: 冯立 刘建茹 张丽华 张志强 张晓丹 张玉奎 杨青
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 组织激肽释放酶原 昆虫细胞 表达
• 年，卷（期）: 2006,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 7-9
• 页数: 3页
• 分类号: Q96
• 字数: 1555字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-311X.2006.06.003

摘要

目的:利用杆状病毒-昆虫细胞表达系统表达proHUK,系统优化表达条件.方法:用改进的方法对昆虫细胞进行了无血清悬浮适应培养,用ELISA、SDS-PAGE方法对各种条件下proHUK的表达量进行检测.结果:Sf-9、Hi-5细胞在血清减量速度为5%、1%,接种密度分别为2×106cells/mL、1×106cells/mL时能很快适应无血清悬浮培养.在病毒感染复度MOI为10,细胞接种密度为1×106cells/mL条件下培养96h后,proHUK的表达量最高可达30mg/L.结论:改进的方法使昆虫细胞能更快适应无血清悬浮生长条件,获得了高表达proHUK的方法,为其大规模制备奠定了基础.