小鼠骨髓干细胞向肝细胞转化的体外实验研究

• 作者: 丁义涛 仇毓东 施晓雷 朱章华 李雷 谢婷 陈蕾蕾
• 来源期刊: 中华肝胆外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 骨髓干细胞 肝细胞 分化 诱导
• 年，卷（期）: 2006,（7）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 479-483
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 4145字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1007-8118.2006.07.014

摘要

目的建立以30 ng/ml FGF-4和30 ng/ml OSM为主的诱导培养体系,研究体外骨髓干细胞向肝细胞的转化过程中细胞形态、结构、功能的变化.方法建立以30ng/ml FGF,30ng/mlOSM为主的小鼠骨髓干细胞诱导培养体系.观察细胞形态和数量的变化;RT-PCR、Western blot、免疫荧光染色检测肝细胞特异性标记物的表达;通过PAS糖原染色、白蛋白ELISA、尿素合成试验,检测细胞的合成和代谢功能.结果诱导12 d,观察到多极性的肝细胞样细胞,且逐渐增多、集落不断增大.在诱导过程中,不同的时间点可以分别检测到HNF-3βmRNA、ALBmRNA、CK18mRNA、TTRmRNA、G6-PasemRNA和TATmRNA的表达.诱导21 d,细胞表达HNF-3β、ALB、CK18蛋白;免疫荧光定位示ALB表达于胞浆和胞膜,而CK18表达于胞浆.诱导21 d,细胞胞浆内可见红染的糖原颗粒;在诱导过程中,不同的时间点检测到细胞分泌ALB、合成尿素的量的变化.结论我们建立的以30ng/ml FGF、30 ng/ml OSM为主的诱导培养体系,可以有效地促进骨髓干细胞体外定向转化为肝细胞.