基于细胞因子对介导同种异体反应的 T淋巴细胞的测定和富集及扩增

• 作者: 孟筱坚 林茂芳 蔡真
• 来源期刊: 浙江大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: T-淋巴细胞 干扰素Ⅱ型 酶联免疫吸附测定
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 39-44
• 页数: 6页
• 分类号: R457.7
• 字数: 4119字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2006.01.008

摘要

目的:对同种异体外周血单个核细胞(PBMNCs)刺激后分泌细胞因子的T淋巴细胞进行测定、富集和扩增,为研究介导同种异体反应的T淋巴细胞提供新的途径.方法:利用细胞因子分泌检测方法(CKSA),从单细胞水平定量测定人混合淋巴细胞反应中分泌干扰素-γ(IFN-γ)的T淋巴细胞;并对其进行磁性富集、扩增,再用酶联免疫斑点法(ELISPOT)检测其对原抗原的特异性.结果:同种异体PBMNCs刺激后检测到分泌IFN-γ的T淋巴细胞水平较对照组明显升高[(1.12±0.13)% vs (0.23±0.07)%,P<0.05],进一步富集达(67.3±10.5)%,相对倍数为(93.8±22.1)倍.经过富集的细胞能够通过OKT3、抗CD28单抗和IL-2组合,在21～28 d扩增>600倍,扩增后的细胞保留与原相关异基因刺激细胞特异性反应,并具分泌IFN-γ的能力.结论:利用CKSA从单细胞水平定量测定到显著升高的由同种异体PBMNCs刺激后分泌IFN-γ的T淋巴细胞.这些细胞可以被有效地富集和扩增,并保留针对原抗原的特异反应性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	林茂芳	浙江大学医学院附属第一医院血液科	98	560	13.0	18.0
2	蔡真	浙江大学医学院附属第一医院血液科	40	190	8.0	12.0
3	孟筱坚	浙江大学医学院附属第一医院血液科	7	34	3.0	5.0