长距离反向PCR技术高效扩增已知DNA片断的侧翼序列

• 作者: 孙芹英 房伟 洪宇植 童品贵 肖亚中 袁璟
• 来源期刊: 激光生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 长距离反向PCR 侧翼序列 漆酶基因
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 46-49
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 3344字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7146.2006.01.009

摘要

为解决传统反向PCR技术扩增片段短、假阳性多的不足,建立了长距离反向PCR(LDI-PCR)扩增技术:0.5 μg DNA/mL的反应体系使DNA酶解片段充分自身环化连接,其产物用25 nt～30 nt的序列特异引物进行长距离PCR.结果表明该方法能特异地扩增出长达16 kb的序列,在已知DNA片段的侧翼序列克隆方面具有高效、简便、特异的优点.