BIBAC2载体转化水稻的研究

• 作者: 丁文静 叶兴国
• 来源期刊: 农业科学研究
• 学科: 生物学
• 关键词: 水稻 双元细菌人工染色体 农杆菌 遗传转化
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 页码范围: 6-9,12
• 页数: 5页
• 分类号: Q943.2
• 字数: 4243字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-0747.2006.01.002

摘要

双元细菌人工染色体(BIBAC)载体具有克隆大片段DNA构建文库和农杆菌介导转化植物的双重功能.利用BIBAC载体,在双子叶植物烟草和番茄中已实现了大片段DNA的转移,但在单子叶植物中的应用还未见报道.本研究利用不同水稻基因型、不同农杆菌菌株,对水稻进行了BIBAC2载体的转化研究.水稻成熟胚诱导愈伤组织经过1～2次继代培养,在含乙酰丁香酮的N6培养基上预培养3 d,在含BIBAC2载体的农杆菌中侵染10 min,26 ℃下共培养3 d.感染后的愈伤组织在含25～50 mg/L潮霉素培养基上经过4～8周的筛选,共得到了66株抗性再生植株.通过对抗性植株中GUS基因的组织化学染色检测,NPTII基因的PCR检测和ELISA检测,HYG基因的PCR检测,确认2株阳性植株来自EHA105菌系侵染的中花15号愈伤组织,1株阳性植株来自EHA105菌系侵染的中花8号愈伤组织,转化率分别为2.9%和0.9%.结果表明,BIBAC2载体已被成功导入了水稻基因组中,转化效果EHA105菌株优于C58C1菌株,中花15号、中花8号优于中花10号和中花11号.结果还表明,利用三亲交配法可以将大于23.5 kb的载体转化到农杆菌中.初步建立了BIBAC2载体转化水稻的技术体系,为利用BIBAC系统向水稻转入大片段DNA和多个外源功能基因奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	叶兴国	中国农业科学院作物科学研究所	31	1079	16.0	31.0
2	丁文静	中国农业科学院作物科学研究所	2	69	2.0	2.0