人乳头状瘤病毒亚型PCR/RDB基因分析方法的建立及初步评价

• 作者: 徐湘民 朱岩 李晴 蔡筠 谢建生
• 来源期刊: 华南预防医学
• 学科: 医学
• 关键词: 乳头瘤病毒,人 基因分型 聚合酶链反应 反向点杂交
• 年，卷（期）: 2006,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 9-13
• 页数: 5页
• 分类号: R730.261
• 字数: 4216字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-5039.2006.04.003

摘要

目的 建立一种基于PCR和RDB技术的临床实用、价格低廉、能对目前已知的绝大多数高危型及常见的低危型人乳头状瘤病毒(HPV)进行基因分型的检测方法(PCR/RDB法),并对该方法用于HPV分型检测做出方法学评价.方法 根据HPV基因序列设计可扩增包含目前常见的HPV型别的通用引物,并根据14种HPV高危亚型(16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66、68)和7种低危亚型(6、11、42、43、53、53、CP8304)的序列特点设计针对这21种HPV型别的型特异性探针.21种HPV亚型标准毒株PCR产物与HPV型特异性探针进行杂交,建立一次性对21种HPV亚型进行分型的PCR/RDB检测方法.将PCR/RDB法用于213例经杂交捕获法(hybird capture,HC Ⅱ)检测为高危型HPV阳性样本的HPV型别诊断.结果 建立的PCR/RDB法均能鉴定出21种HPV亚型,无假阳性和假阴性结果,未出现交叉反应;含有相当于10个以上HPV分子的质粒标准品均能成功获得PCR产物检测的阳性结果;盲法分析结果显示,195例经HCⅡ法检测为高危型HPV阳性的样品被PCR/RDB检测出具体的HPV型别,共检测出13种高危型HPV亚型,检出率分别是32.31%(16型)、23.08%(52型)、17.95%(58型)、11.79%(31型)、10.26%(68型)、9.74%(33型)、8.21%(18型)、6.15%(66型)、3.08%(59型)、2.05%(45型)、2.05%(39型)、1.54%(56型)、1.03%(51型).单一HPV亚型感染及2种、3种和4种HPV亚型混合感染构成比分别为59.46%、30.81%、8.65%和1.08%.18例未能检测出HPV的具体型别,PCR/RDB法与HCⅡ法的高危型HPV检测结果的符合率为91.5%(195/213).结论 PCR/RDB法与HCⅡ法高危型HPV检测阳性符合率高,并可一次性分析出21种HPV型别,是一种准确、高效、经济的HPV型别检测方法,可用于HPV的常规基因型分型诊断及人群筛查.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	谢建生		34	198	9.0	12.0
2	蔡筠		14	81	6.0	8.0
3	李晴		30	107	6.0	9.0
4	朱岩		8	19	2.0	4.0
5	徐湘民	南方医科大学医学遗传学教研室	27	242	9.0	15.0