花鲈胚胎干细胞移植及嵌合体的构建

• 作者: 刘洋 叶寒清 唐启升 孟亮 沙珍霞 田永胜 陈松林
• 来源期刊: 高技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 花鲈胚胎干细胞(LJES1) 绿色荧光蛋白(GFP) 细胞移植 显微注射 嵌合体
• 年，卷（期）: 2006,（2）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 186-190
• 页数: 5页
• 分类号: Q81
• 字数: 5919字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1002-0470.2006.02.016

摘要

旨在通过花鲈胚胎干细胞(LJES1)移植构建嵌合体,证实LJES1细胞的体内分化能力和发育全能性.采用脂质体介导法将线性化pCMV-EGFP质粒导入到长期培养的LJES1细胞内,细胞绿色荧光蛋白(GFP)的表达率为5%～10%,以此为供体,通过显微注射方法把20～50个LJES1细胞移植到花鲈囊胚中,共移植囊胚478枚,获得了20枚表达GFP的嵌合体胚胎,其中的15枚胚胎发育成鱼苗.荧光显微观察和PCR检测显示了LJES1细胞可在宿主胚胎内片状嵌合和单细胞分散嵌合,嵌合部位可分布于胚体的三个胚层;同时也证明GFP是一种优良的遗传标记.本实验结果为证实LJES1细胞的发育全能性提供了有力证据.