雌激素调控的绿色荧光蛋白在酵母细胞中的表达

• 作者: 吴玉娟 张唯立 李湘鸣 祝娉婷 罗方妮 陈春波
• 来源期刊: 扬州大学学报（农业与生命科学版）
• 学科: 农学
• 关键词: 环境雌激素 酵母细胞 基因重组 绿色荧光蛋白
• 年，卷（期）: 2006,（2）
• 页码范围: 63-67
• 页数: 5页
• 分类号: S856.9|X503.22
• 字数: 4356字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-4652.2006.02.015

摘要

采用绿色荧光蛋白(GFP)作为报告基因,用酵母细胞构建环境雌激素(EEH)的评价体系,可敏感、快速、方便地筛选出EEH化合物.通过分子生物学技术,将GFP基因插入到pMP206/ERE启动子CYC1的下游,用GFP取代Lac Z基因,并转化于酵母细胞.DNA测序发现ERE-CYC1-GFP框架正确.对转化子进行PCR鉴定,发现有雌激素受体基因(hER cDNA)和GFP基因特异条带,说明hER cDNA和GFP已重组于酵母细胞.荧光显微镜下发现大量的绿色荧光颗粒,表明GFP基因在酵母细胞中成功表达.酵母细胞经不同浓度雌二醇作用后,与GFP表达量有剂量效应关系.与其他酵母评价体系相比,以GFP为报告基因评价EEH不需要破坏细胞壁,也不需要底物,可在96孔板中完成,这为高通量筛选EEH化合物奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李湘鸣	扬州大学医学院	54	273	9.0	13.0
2	罗方妮	扬州大学动物科学与技术学院	30	188	9.0	12.0
3	祝娉婷	扬州大学医学院	27	110	7.0	9.0
4	陈春波	扬州大学兽医学院	8	79	6.0	8.0
5	吴玉娟	扬州大学动物科学与技术学院	11	84	6.0	9.0
6	张唯立	扬州大学医学院	1	9	1.0	1.0