杨梅RAPD-PCR体系的正交优化研究

• 作者: 张雷凡 朱玉球 童再康 高燕会 黄华宏
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 农学
• 关键词: 杨梅 RAPD 体系优化 正交设计
• 年，卷（期）: 2006,（3）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 55-58
• 页数: 4页
• 分类号: S667.6
• 字数: 3290字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-311X.2006.03.021

摘要

以杨梅DNA为模板,对影响杨梅RAPD-PCR扩增的重要参数进行了优化试验,以期建立杨梅RAPD反应的最佳体系.通过采用正交试验设计的方法,对杨梅RAPD-PCR条件进行了优化,结果表明最佳的杨梅RAPD-PCR的反应体系(20μl)中含有1×buffer,1.0U TaqDNA聚合酶,3.0mmol/L MgCl2,0.30mmol/L dNTPs,1.5μmol/L引物和模板DNA 30-40ng.适宜的扩增条件为94℃预变性3min,再进入38个PCR循环(94℃变性30s,38℃退火30s,72℃延伸90s),72℃延伸7min,4℃保存.