bcl-2 siRNA的设计、合成及其对HL-60 bcl-2基因表达的干扰作用

• 作者: 涂玉林 燕春艳 钟苗 陈欣 雷小勇
• 来源期刊: 白血病·淋巴瘤
• 学科: 医学
• 关键词: bcl-2 siRNA HL-60bcl-2 基因表达
• 年，卷（期）: 2006,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 323-326
• 页数: 4页
• 分类号: R73-354
• 字数: 4116字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-9921.2006.05.002

摘要

目的 应用RNA干扰技术研究bcl-2 siRNA对白血病细胞HL-60 bcl-2基因表达的干扰作用.方法 扫描bcl-2 mRNA的全序列,记录从AUG启动子的AA及下游19个核苷酸肽作为潜在作用靶点.GC含量控制在30%～65%之间.由BLAST分析排除与其他基因有高度同源性的序列.由体外转录合成法合成双链bcl-2 siRNA,将bcl-2 siRNA转染入HL-60细胞.收集转染48 h后的细胞,流式细胞术检测蛋白表达情况,筛选出最佳作用序列进一步作各项指标检测.从mRNA水平、蛋白质水平等观察bcl-2 siRNA对细胞HL-60 bcl-2基因表达的干扰作用.结果 收集转染48 h后的细胞,经细胞免疫荧光、RT-PCR、MTT及Hoechst33258荧光染色等指标检测,可见转染bcl-2 siRNA阳性组的细胞bcl-2基因表达降低及HL-60细胞凋亡等现象.而转染GAPDH siRNA组的细胞对bcl-2表达无影响.结论 采用生物信息学的方法设计出有效siRNA靶位点;bcl-2 siRNA可通过降低bcl-2 mRNA水平特异性抑制bcl-2蛋白质的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	雷小勇	南华大学生命科学与技术学院药物药理研究所	102	531	13.0	16.0
2	燕春艳	济宁医学院病理教研室	17	66	5.0	7.0
3	钟苗	南华大学生命科学与技术学院药物药理研究所	7	54	5.0	7.0