高致病性禽流感病毒血凝素基因定点突变及其原核表达

• 作者: 刘伯华 夏玉坤 户义 李靖 杨保安 杨银辉 祝庆余 秦鄂德
• 来源期刊: 医学分子生物学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 高致病性禽流感病毒 血凝素基因 定点突变 原核表达
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 8-12
• 页数: 5页
• 分类号: Q93
• 字数: 3952字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2006.01.002

摘要

目的改构高致病性禽流感病毒血凝素基因,建立有效的原核表达体系.方法利用位点特异PCR突变技术同义突变HA1基因中的稀有密码子,将改构的HA1基因克隆到pGEX-4T-1载体中建立4T-1-HA1-m+重组表达质粒,然后转入E.coli BL21 DE3中并用IPTG诱导表达HA1-GST融合蛋白,SDS-PAGE电泳检测目的蛋白,Western印迹分析表达产物的免疫活性.结果改构的HA1基因能够在大肠埃希菌中有效表达,表达产物能与H5N1亚型高致病性禽流感病毒免疫鼠血清特异性结合.结论提示高致病性禽流感病毒血凝素基因经位点特异PCR突变技术改构后,可以在大肠埃希菌中表达出有免疫活性的血凝素蛋白.