哈维氏弧菌外膜蛋白OmpK基因的克隆及原核表达

• 作者: 于涟 张崇文 毛芝娟 褚武英 钱荣华
• 来源期刊: 水产学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 哈维氏弧菌 外膜蛋白 OmpK 原核表达
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 页码范围: 9-14
• 页数: 6页
• 分类号: Q78|Q936
• 字数: 4376字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-0615.2006.01.002

摘要

根据哈维氏弧菌外膜蛋白OmpK的基因序列设计一对引物,应用聚合酶链式反应(PCR)方法,从分离自患病大黄鱼的哈维氏弧菌基因组中扩增获得一段约800 bp的序列.将其克隆到pGEM-Teasy载体,测序结果证明该序列是哈维氏弧菌外膜蛋白OmpK基因.用PCR方法去除其信号肽序列,定向克隆到原核表达载体pGEX-4T-2构建重组表达质粒pGEX-4T-OmpK.IPTG诱导后能够在大肠杆菌BL21中高效表达分子量约为53kD的GST-OmpK融合蛋白.用纯化后的融合蛋白免疫新西兰兔获得了高效价的抗血清.Western-blotting分析表明,它与从哈维氏弧菌中提取的约27 kD的外膜蛋白能够发生特异反应,提示外膜蛋白OmpK可能是哈维氏弧菌的重要保护性抗原之一.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	于涟	浙江大学动物预防医学研究所	48	588	15.0	22.0
2	毛芝娟	浙江大学生物医学工程学院	5	63	4.0	5.0
6	褚武英	浙江大学生物医学工程学院	4	48	4.0	4.0
10	张崇文	浙江大学生物医学工程学院	2	37	2.0	2.0