应用蛋白质组学技术筛选胃癌耐药相关蛋白质

• 作者: 张桂英 张鹏飞 易红 朱果 李建玲 杨轶轩 肖志强 陈主初
• 来源期刊: 生物化学与生物物理进展
• 学科: 医学
• 关键词: 长春新碱 胃癌 多药耐药 蛋白质组 二维凝胶电泳 质谱 免疫印迹 定量PCR 反义核苷酸
• 年，卷（期）: 2006,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 267-276
• 页数: 10页
• 分类号: R735.2
• 字数: 5249字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3282.2006.03.010

摘要

胃癌多药耐药性是临床胃癌化疗失败最主要的原因之一,但其分子机制仍然不太清楚.为了寻找新的胃癌耐药相关的蛋白质,揭示胃癌多药耐药的分子机制,以胃癌细胞SGC7901和长春新碱诱导的耐药胃癌细胞SGC7901/VCR为研究对象,应用二维凝胶电泳(two-dimensional electrophoresis,2-DE)技术分离两种细胞的总蛋白质,图像分析识别差异表达的蛋白质点,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)及电喷雾电离串联质谱(electrospray ionization tandem mass spectrometry,ESI-Q-TOF)对差异表达的蛋白质点进行鉴定,蛋白质印迹和实时RT-PCR验证部分差异蛋白质在两株细胞中的表达水平,反义核酸转染技术分析HSP27(heat shock protein 27,HSP27)高表达与SGC7901/VCR耐药的相关性.得到了分辨率较高、重复性较好的两株细胞系的二维凝胶电泳图谱,质谱分析共鉴定了24个差异蛋白质点,蛋白质印迹和实时RT-PCR验证了部分差异蛋白的表达水平,反义寡核苷酸抑制HSP27表达能增加SGC7901/VCR对长春新碱的敏感性.研究结果不仅提示这些差异蛋白质如HSP27,Sorcin等可能与胃癌的多药耐药相关,而且为揭示胃癌细胞的多药耐药性产生机制提供了线索.