蜡质芽孢杆菌aiiA基因的克隆及融合表达

• 作者: 俞晓敏 姚帆 杨梅 黄天培 黄张敏 黄必旺 黄志鹏
• 来源期刊: 《福建农林大学学报（自然科学版）》
• 关键词: 蜡质芽孢杆菌(Bc) aiiA 基因克隆 序列分析 生物信息学 系统发育树 融合蛋白
• 年，卷（期）: 2006,（3）
• 所属期刊栏目: 生命科学
• 页码范围: 292-297
• 页数: 6页
• 分类号: S476+.11|Q786
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1671-5470.2006.03.016

摘要

设计一对可扩增aiiA基因完整的开放阅读框的简并引物对aiiA1和aiiA2,通过PCR技术对3株蜡质芽孢杆菌(Bc)的aiiA基因进行检测.结果表明,它们均含有aiiA基因.利用pMD18-T克隆载体直接从GP7菌株的PCR产物中克隆了aiiA基因.测序结果表明,该基因(GenBank登录号:AY943831)由753个碱基组成,编码含有250个氨基酸残基的蛋白质.该蛋白质推测的分子质量为28 ku,等电点约4. 235.核苷酸序列的BLAST分析结果表明,与之同源性较高的基因均为Bc组aiiA基因(87%-99%).在氨基酸序列多重比较的基础上,应用PHYLIP软件构建了AiiA蛋白的系统发育树.此外,利用原核融合表达载体pMXB10初步研究了AiiA、几丁质结合蛋白(CBD)及Intein融合蛋白诱导表达的情况.