转染嵌合性T细胞受体基因小鼠T淋巴细胞的体外抗肿瘤作用

• 作者: Alfred E Chang James J Mule Kevin T McDonagh Michael S Friedman 李峤 杨建民
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 嵌合性T细胞受体 基因转染 免疫治疗 小鼠 T淋巴细胞
• 年，卷（期）: 2006,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 243-248
• 页数: 6页
• 分类号: R730.59
• 字数: 5875字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2006.04.002

摘要

目的:研究小鼠T淋巴细胞在转染嵌合性T细胞受体基因后的体外抗肿瘤作用.方法:应用重组DNA技术,将HER2特异性嵌合性T-细胞受体构建入逆转录病毒载体;转入包装细胞后,收集病毒上清,转染小鼠T淋巴细胞,转基因后的小鼠T淋巴细胞分别与HER2阳性(SK-OV-3)或阴性(MCF-7)的肿瘤细胞系共培养,检测其细胞因子γ干扰素释放,51Cr释放法检测CTL评价其抗肿瘤效应.结果:所构建载体经酶切鉴定符合要求,乒乓法转染包装细胞系GP+E86,检测病毒滴度为1.2×106,Retronectin结合离心法转染经抗CD3/CD28单抗活化的小鼠T淋巴细胞,转染效率可达50%以上;转染嵌合性T细胞受体基因的T淋巴细胞与HER2阳性或阴性的肿瘤细胞系共培养后可检测到HER2特异性的细胞因子γ干扰素释放,51Cr释放法测CTL可见转染嵌合性T细胞受体基因T淋巴细胞对HER2阳性的肿瘤细胞具显著杀伤效应.结论:转染嵌合性T细胞受体基因的小鼠T淋巴细胞在体外可通过细胞因子释放和CTL效应发挥显著的抗肿瘤作用.