2种免疫层析技术用于4种传染病及其病原体检测的研究

• 作者: 侯友松 周蕾 姚李四 李伟 杨瑞馥 王静 胡孔新 闫中强 陈维娜
• 来源期刊: 中国国境卫生检疫杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 炭疽杆菌芽孢 鼠疫杆菌 肠出血性大肠埃希菌O157:H7 SARS病毒 免疫层析法 胶体金 上转磷光(UCP)
• 年，卷（期）: 2006,（z1）
• 所属期刊栏目: 实验研究与疾病监测
• 页码范围: 27-34
• 页数: 8页
• 分类号: R51
• 字数: 6040字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-9770.2006.z1.009

摘要

[目的]寻求能够快速定性/定量检测4种传染病及其病原体的试验方法.[方法]应用双抗体夹心法,建立胶体金免疫层析法、上转磷光(UCP)免疫层析法检测炭疽杆菌芽孢(以下简称炭疽芽孢)、鼠疫杆菌、肠出血性大肠埃希菌O157∶H7(以下简称EHEC O157),评价方法的灵敏性、特异性.通过分别检测模拟掺入3种菌/芽孢的"白色粉末"和检测3种细菌的强毒株,评价在实际环境样品检测中的应用.应用双抗原夹心法,建立胶体金免疫层析法、上转磷光(UCP)免疫层析法检测鼠疫F1抗体、SARS病毒抗体,检测239份青海鼠疫疫区人员血清、1 236份新疆鼠疫疫源地鼠血清,检测18份恢复期SARS病人血清和9份健康对照者血清,以及206份出入境健康人员血清,考核2种检测抗体的方法在实际样品检测中的应用.通过比较炭疽杆菌、鼠疫杆菌、大肠埃希菌O157以及鼠疫杆菌抗体、SARS病毒抗体的胶体金免疫层析方法、UCP免疫层析方法,比较我们建立的2套系统与加拿大RAMP系统检测炭疽杆菌的能力.[结果]UCP免疫层析方法能在35min内完成检测,炭疽芽孢检测掺入"白色粉末"的样品灵敏性为1×104cfu/test,炭疽芽孢最低检测限为1×105cfu/ml(原溶液芽孢浓度),多种不同的芽孢菌及其它细菌共38种54株检测说明该法特异性良好,仅与腊样芽孢杆菌有交叉反应,特异性为97%;鼠疫杆菌检测灵敏性为5×104cfu/ml,最低检测菌数为5×103cfu/test,在107cfu/ml水平上未发现与30余种细菌有交叉反应,包括最近缘假结核耶尔森菌;EHEC O157检测灵敏性为1×103cfu/ml,仅与弗氏枸橼酸杆菌有交叉反应,特异性为98%.胶体金免疫层析方法能在10min内完成检测,炭疽芽孢、鼠疫杆菌、EHEC O157检测灵敏度分别为1×106cfu/ml、1×105cfu/ml、1×105cfu/ml,"白色粉末"等环境样品最低可检测敏感性为1×105cfu,1×104cfu,1×104cfu/test.胶体金免疫层析方法分别应用于炭疽、鼠疫强毒株的检测,检测限为5×104cfu/test和7×104cfu/test.在实际血清样品检测中,与间接血凝方法对比,鼠疫抗体UCP和胶体金免疫层析方法有更好的敏感性.血清样品检测显示,SARS抗体的胶体金和UCP免疫层析方法均有较好的特异性和敏感性.[结论]2种免疫层析方法都有快速、敏感、特异的特点:上转磷光免疫层析方法可实现定量检测,敏感性优于胶体金免疫层析法;炭疽检测与加拿大RAMP检测系统相当;胶体金免疫层析法具有简便、直观、易行的特点.2种免疫层析方法均适合于炭疽芽孢芽孢、鼠疫杆菌、EHEC O157、鼠疫杆菌抗体、SARS抗体的现场检测和筛查.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡孔新		40	261	10.0	15.0
2	王静		60	365	10.0	17.0
3	杨瑞馥	军事医学科学院微生物流行病研究所	180	1706	21.0	33.0
4	周蕾	军事医学科学院微生物流行病研究所	28	247	8.0	15.0
5	姚李四		23	207	7.0	14.0
6	李伟		6	156	6.0	6.0
7	陈维娜		6	156	6.0	6.0
8	侯友松		4	31	3.0	4.0
9	闫中强	军事医学科学院微生物流行病研究所	5	147	5.0	5.0