人大肠癌HCT-8/5-FU耐药细胞株的建立及P-gp测定

• 作者: 华建平 孙淑红 布立民 赖靖 韩英 鲍文漪
• 来源期刊: 世界华人消化杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肿瘤细胞 细胞培养 大肠癌 耐药细胞株 多药耐药 P-糖蛋白
• 年，卷（期）: 2006,（21）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 2082-2086
• 页数: 5页
• 分类号: R73
• 字数: 4989字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-3079.2006.21.007

摘要

目的:建立人大肠癌多药耐药细胞株HCT-8/5-FU及并对其耐药机制进行探讨.方法:先采用较大剂量间歇诱导法进行筛选,再采用浓度梯度递增法作用,历时7 mo,至HCT8细胞可长期在5-FU浓度为2.0 mg/L的细胞培养液中稳定生长.电镜、HE染色观察2种细胞形态结构差异.体外细胞毒性实验观察他对5-FU, ADM,DDP的耐药性.绘制亲本细胞和耐药细胞的体外生长曲线.罗丹明染色法检测其两种细胞P-gp功能表达.结果:HCT-8细胞株经7 mo诱导,可在5-FU 2.0 g/L的培养液中稳定增殖,具有多药耐药性,命名为HCT-8/5-FU,该细胞株对5-FU的耐药指数为16.6,并对ADM,DDP有交叉耐药性.该细胞株体外群体倍增时间与亲本细胞差别不显著.HE染色观察耐药细胞胞体较亲本细胞大,细胞核不规则,可见双核、多形核,细胞形态不规则,呈多角形、细长形改变,可见巨核细胞.透射电镜下耐药细胞胞质内线粒体、内质网、溶酶体增多.流式细胞仪罗丹明染色法观察荧光强度曲线左移,提示耐药细胞有过度P-gp表达.结论:成功建立HCT-8/5-FU多药耐药细胞株.先采用较大剂量间歇诱导进行筛选,再采用浓度梯度递增法作用是诱导大肠癌耐药细胞株的较好方式.HCT-8/5-FU细胞株的耐药机制与P-糖蛋白表达有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	韩英	北京军区总医院消化科	186	1085	17.0	23.0
2	华建平	天津市第一中心医院消化科	33	181	9.0	11.0
3	鲍文漪	天津市第一中心医院消化科	9	38	4.0	5.0
4	孙淑红	承德医学院外科教研室	14	52	5.0	7.0
5	布立民	天津市第一中心医院消化科	5	24	3.0	4.0
6	赖靖	解放军464医院内二科	1	9	1.0	1.0