地衣芽孢杆菌胞外蛋白酶的纯化及特性分析

• 作者: 冯娟 吴灶和 曹煜成 李卓佳
• 来源期刊: 水生生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 地衣芽孢杆菌 胞外产物 纯化 特性分析
• 年，卷（期）: 2006,（3）
• 页码范围: 262-268
• 页数: 7页
• 分类号: Q936
• 字数: 4796字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3207.2006.03.003

摘要

研究不同条件对地衣芽孢杆菌De株产生胞外蛋白酶的量及其酶活性的影响,结果表明在pH为7.4-8.2范围内,温度为30℃时,培养8-12h的菌株所分泌胞外产物中的蛋白酶活性最高.实验先以半透膜法收集芽孢杆菌的胞外产物,然后再经过硫酸铵沉淀过夜、Sephadex G-100凝胶层析和DEAE-Cellulose离子交换层析及聚丙烯酰胺凝胶电泳等四个步骤的分离纯化后,可以得到含有3种主要蛋白质(BLP1、BLP2、BLP3)成分的胞外蛋白酶,其分子量分别为66.2KD、31.0KD及约20.1KD,所得纯化蛋白酶的蛋白浓度为0.773μg/mL,蛋白回收率为11.66%.实验还发现,纯化的胞外蛋白酶在100℃下作用30min,仍可保持其活力,可见具有相当的热稳定性,而其酶活最佳的pH和温度条件分别为7.8和45- 65℃.酶活抑制实验显示EDTA、铜、钴、镁离子等均可成为其酶活抑制因子;而丝氨酸蛋白酶抑制剂甲基磺酰氟(PMSF)、铁、锰、钡、钙离子等对酶活性没有明显影响;锌则会令之酶活性其部分丧失.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李卓佳	中国水产科学研究院南海水产研究所	154	2708	31.0	43.0
2	曹煜成	中国水产科学研究院南海水产研究所	58	962	19.0	28.0
4	冯娟	中国水产科学研究院南海水产研究所	71	1363	22.0	33.0
5	吴灶和	湛江海洋大学水产学院	19	726	13.0	19.0