大鼠蛋白聚糖Ⅱ重组腺病毒糖尿病大鼠视网膜早期病变保护作用的研究

• 作者: 吴芳 姚航平 李红 董凤芹
• 来源期刊: 浙江大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 蛋白聚糖类/生物合成 腺病毒科/遗传 重组 遗传 转染 转化生长因子β/遗传学 遗传载体 细胞 培养的
• 年，卷（期）: 2006,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 523-528
• 页数: 6页
• 分类号: R58
• 字数: 4025字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2006.05.011

摘要

目的:构建大鼠蛋白聚糖Ⅱ(DCN)重组腺病毒载体(Ad-DCN),鉴定其生物学活性.方法:用RT-PCR技术从大鼠肾脏组织mRNA中扩增获得全长DCN基因;将DCN基因克隆至腺病毒穿梭载体,与腺病毒骨架质粒在BJ5183-AD-1细菌中同源重组,并转染至Ad293细胞,扩增病毒后,用病毒空斑形成实验检测病毒滴度,并用MTT、RT-PCR、Western blot对其活性及表达情况进行鉴定.结果:本实验构建的Ad-DCN滴度可达1×109 pfu·ml-1,能在CHO细胞中高效表达具有生物学活性的DCN蛋白;表达产物能拮抗TGFβ1对CCL-64细胞增殖的抑制作用,TGFβ1+表达产物DCN处理组细胞增殖率明显高于TGFβ1单独处理组和TGFβ1+Ad-lacz处理组[(0.5252±0.04 vs 0.2826±0.02、0.2918±0.02)OD,P＜0.05],但TGFβ1+表达产物DCN处理组细胞增殖率仍低于未处理组[(0.9332±0.08)OD,P＜0.05].结论:本实验构建的DCN重组腺病毒能高效表达具有生物学活性的DCN蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李红	浙江大学医学院附属第一医院内分泌科	143	1487	21.0	32.0
2	吴芳	浙江大学医学院附属第一医院内分泌科	26	67	5.0	6.0
3	姚航平	浙江大学医学院附属第一医院内分泌科	94	547	12.0	17.0
4	董凤芹	浙江大学医学院附属第一医院内分泌科	17	193	7.0	13.0