转hTNF-α基因在鱼腥藻中表达产物的提取及其初步纯化

• 作者: 冉亮 宋东辉 张芃芃 张越男 施定基 牛黎莉 赵兴贵 邓元告 郭玉蓉 韩睿
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 生物学
• 关键词: 人肿瘤坏死因子α 鱼腥藻7120 提取缓冲液 温度处理 硫酸铵沉淀处理
• 年，卷（期）: 2006,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 88-92
• 页数: 5页
• 分类号: Q94
• 字数: 3851字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-5464.2006.02.020

摘要

研究了转hTNF-α基因鱼腥藻7120(Anabaena sp.PCC 7120)中表达产物的最佳提取条件,并研究目标蛋白hTNF-α对温度耐受度和硫酸铵盐析的条件,对总蛋白和目标蛋白进行了检测.结果表明,hTNF-α的最佳溶出条件为:0.05 mol/L、pH7.5Tris-HCl缓冲液,NaCl的浓度为0.2 mol/L;当温度为55℃时,处理30min,其hTNF-α提取量下降不明显,回收率达到92.08%,可除去约40%的杂蛋白;先用饱和度为30%的硫酸铵沉淀杂蛋白,再用60%的硫酸铵沉淀目标蛋白,又可除去部分杂蛋白.