转移正相关基因mag-1的原核表达及抗体制备

• 作者: 徐元基 杜芝燕 王妍 蔺会云 谭晓刚 陆应麟 陈惠华
• 来源期刊: 军事医学科学院院刊
• 学科: 生物学
• 关键词: mag-1 基因表达 抗体 酶联免疫吸附测定
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 48-50
• 页数: 3页
• 分类号: Q786
• 字数: 3099字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-9960.2006.01.013

摘要

目的:克隆人mag-1基因,在大肠杆菌中进行表达并制备其抗体.方法:利用PCR方法从含有mag-1基因全长序列的pcDNA3-mag-1质粒上扩增mag-1基因开放阅读框(ORF),将其插入表达载体pET-28a(+)中,构建重组表达载体pET-28a-mag-1,用IPTG诱导目的基因在E.coli中的表达,并通过Western印迹方法对表达产物进行鉴定.表达产物经过初步纯化后作为抗原免疫兔制备多克隆抗体.结果:所获得的序列经测序分析与源序列一致;SDS-PAGE分析表明,经0.1 mmol/L IPTG 37℃诱导6 h后在E.coli中有大量的融合蛋白表达,相对分子质量约为18 ×103.Western印迹分析提示,诱导表达产物能与His单抗发生特异反应.ELISA结果表明获得了高效价的多克隆抗体.结论:获得了His-mag-1融合蛋白在大肠杆菌中高效表达,并制备了其相应的多克隆抗体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杜芝燕	军事医学科学院基础医学研究所	39	184	8.0	12.0
2	陈惠华	军事医学科学院基础医学研究所	18	66	3.0	7.0
3	陆应麟	军事医学科学院基础医学研究所	50	330	9.0	16.0
4	蔺会云	军事医学科学院基础医学研究所	10	36	3.0	5.0
5	徐元基	军事医学科学院基础医学研究所	31	150	7.0	11.0
6	王妍	军事医学科学院基础医学研究所	19	61	5.0	6.0
7	谭晓刚	军事医学科学院基础医学研究所	4	7	2.0	2.0