热纤梭菌β-葡聚糖酶基因的克隆和表达

• 作者: 乐国伟 吕文平 韩晋辉
• 来源期刊: 中国食品学报
• 学科: 工学
• 关键词: β-葡聚糖酶 热纤梭菌 克隆 大肠杆菌 表达
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 320-324
• 页数: 5页
• 分类号: TS2
• 字数: 3560字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-7848.2006.01.067

摘要

提取热纤梭菌(Clostridium.sp)基因组DNA,首次通过PCR克隆了该菌的β-葡聚糖酶基因全长.结果表明:该基因全长1 040 bp,ORF为1003 bp,编码334个氨基酸,计算分子质量为37.8 kD,等电点为7.67.经Blast分析,该序列与热纤梭菌同源性最高(99%),而与基因库中嗜热梭菌的同源性为94%,该基因已被GenBank接受(AY225318).用Bam H Ⅰ和Xho Ⅰ双酶切目的片段和表达载体pET-30a(+)后相连接,构建重组表达载体pET-clo,并导入BL21细菌中表达.酶学特性表明:SDS-PAGE电泳在37 kD左右有表达蛋白带,该工程菌最适酶活29.4U/mL,是出发菌的15倍,最适温度80℃,最适pH9.该工程菌可作为耐热性材料构建耐热性好、酶活高的杂合基因工程菌.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	乐国伟	江南大学食品学院食品营养与安全教育部重点实验室	261	2526	26.0	35.0
2	吕文平	江南大学食品学院食品营养与安全教育部重点实验室	23	90	5.0	8.0
3	韩晋辉	江南大学食品学院食品营养与安全教育部重点实验室	3	50	3.0	3.0