噬菌体随机肽库淘选桔霉素模拟表位的研究

• 作者: 许杨 黄思敏
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 工学
• 关键词: 噬菌体示肽库 模拟表位 桔霉素 单克隆抗体 免疫分析
• 年，卷（期）: 2006,（12）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 67-70
• 页数: 4页
• 分类号: TS2
• 字数: 3159字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1002-6630.2006.12.009

摘要

目的:从噬菌体随机肽库中淘选模拟桔霉素表位的噬菌体粒子.方法:以抗桔霉素的单克隆抗体为配基,分别免疫亲和淘选以融合蛋白形式表达在丝状噬菌体M13外壳蛋白Ⅲ上的随机7肽库和12肽库,以ELISA方法鉴定阳性克隆,同时进行DNA测序以分析插入的7肽和12肽的氨基酸序列.结果:经过3轮淘选,在7肽库中淘选到20株能与该抗体特异性结合的阳性克隆,在12肽库中淘选到33株能与该抗体特异性结合的阳性克隆,且该结合均能被桔霉素阻断,模拟表位的共有序列为X-组氨酸-赖氨酸-X-X-X-X,X为任意氨基酸.以7肽库中亲和力最强的克隆(P10)建立了竞争ELISA检测方法,线性范围为10～325 ng/ml,检测下限为10 ng/ml;以12肽库中亲和力最强的克隆(P1)建立了竞争ELISA检测方法,线性范围为10～439 ng/ml,检测下限为10 ng/ml.结论:噬菌体展示技术可成功淘选到桔霉素模拟表位,高度保守的His和Lys的存在,提示His和Lys在CIT与其配体的结合中可能起重要作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	许杨	南昌大学中德联合研究院食品科学教育部重点实验室	122	1863	22.0	38.0
2	黄思敏	南昌大学中德联合研究院食品科学教育部重点实验室	2	24	2.0	2.0