用PCR法检测苏云金杆菌的溶原性噬菌体

• 作者: 孙钒 宋少云 庞义 廖威 艾云灿 薛清华 陈维春
• 来源期刊: 中山大学学报（自然科学版）
• 学科: 农学
• 关键词: 苏云金杆菌 溶原性 噬菌体
• 年，卷（期）: 2006,（4）
• 页码范围: 79-82
• 页数: 4页
• 分类号: Q936|Q939|S476
• 字数: 2530字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0529-6579.2006.04.019

摘要

根据苏云金杆菌 (Bacillus thuringiensis, B.t) 溶原性噬菌体GIL01(GenBank Accession Number: AJ536703) 的同源序列设计一对引物,用35株B.t标准菌株和生产菌株MZ1(血清型H3a3b)的过夜培养物作模板, 结果有16株菌株包括MZ1能扩增出大小约为750 bp的预期产物,推测这16株菌为溶原菌.MZ1菌株的过夜培养液与指示菌ZK1(血清型H25)混匀并在双层琼脂上培养12 h后出现了滴度为2×107 pfu的噬菌斑,从而证明生产菌株MZ1确为溶原菌;又以GIL01同源性较高的其它四个基因设计引物,分别以MZ1的培养物及其溶原性噬菌体基因组为模板进行PCR扩增,结果两者得到几乎一致的带型,进一步证明了生产菌株MZ1为溶原菌,说明利用PCR法检测鉴定苏云金杆菌的溶原性是可行的.比较指示菌方法、直接电镜法和DNA鉴定法,PCR法快速简便,对B.t生产上快速检测其溶原性噬菌体有实用意义.