黑花生再生体系和遗传转化的初步研究

• 作者: 乐超银 何正权 余云芳 姚伟 张昌菊 李红梅 梁宏伟 段真珍
• 来源期刊: 河南农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 花生 组织培养 农杆菌介导法 GUS检测
• 年，卷（期）: 2006,（3）
• 所属期刊栏目: 作物栽培·遗传育种
• 页码范围: 38-42,62
• 页数: 6页
• 分类号: S565.2
• 字数: 4354字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-3268.2006.03.011

摘要

以黑花生品种黑霸920成熟种胚、幼叶和胚轴为外植体,对黑花生植株再生和遗传转化进行了研究.通过设置一系列不同浓度激素配比的培养基来优化各阶段培养条件,初步建立了高效的黑花生再生体系,即花生种子经75%乙醇表面消毒15 min,MS+6-BA 2.0 mg/L为最优化的种子萌发培养基,MS+2,4-D 2.0 mg/L为最佳诱导愈伤培养基,幼叶为最佳诱导愈伤组织的外植体,MS+6-BA 8 mg/L+NAA 0.5 mg/L+AgNO31 mg/L为最佳分化培养基,MS+NAA 2.0mg/L+6-BA 0.2 mg/L+活性炭200 mg/L为最佳生根培养基.同时确定了愈伤组织和幼苗的卡那霉素筛选压分别为30 mg/L和300 mg/L.利用农杆菌介导法将含有GUS基因和NPTⅡ基因的植物表达载体pBI121导入花生组织,在对愈伤组织、幼叶和胚轴的GUS表达检测中均有蓝色斑块出现,证明GUS基因已成功转入到花生细胞中.