几种双向凝胶电泳蛋白质检测方法的比较

• 作者: 刘霆 宋鑫 杨金亮 柳斌 秦慧 赵霞 魏于全 黄欣
• 来源期刊: 中国实验血液学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 蛋白质组 双向凝胶电泳 蛋白质检测 考马斯亮蓝染色法 银染
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 实验方法学
• 页码范围: 168-172
• 页数: 5页
• 分类号: Q503
• 字数: 4581字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-2137.2006.01.038

摘要

本研究对蛋白质染色法进行比较和分析,以求获得满足蛋白质组研究所需的适宜的蛋白质检测法.实验采用2-D电泳分离急性早幼粒白血病细胞株NB4的全蛋白及1-D电泳分离蛋白质分子量标准物,从蛋白质检测的灵敏性、质谱兼容性、操作的简便性等角度,比较了传统考马斯亮蓝染色法、胶体考马斯亮蓝染色法、改良考马斯亮蓝染色法和银染法4种蛋白质着色法对凝胶分离蛋白质的检测影响,探讨了影响蛋白质染色与鉴定的影响因素.结果显示,银染检测灵敏度最高,但质谱鉴定相容性差,鉴定率近10%;改良考马斯亮蓝染色法检测灵敏度也高,可达4 ng/spot,质谱鉴定率可接近55%.结论:改良考马斯亮蓝染色法的蛋白质检测灵敏度高,与质谱兼容好,能满足蛋白质组研究需要.