宫颈癌患者HPV16型E6蛋白的表达纯化及血清抗体检测

• 作者: 宋天保 张菊 郭金珠 阎小君 高艳娥
• 来源期刊: 癌症
• 学科: 医学
• 关键词: 人乳头瘤病毒16型 E6蛋白 基因表达 血清抗体 宫颈肿瘤
• 年，卷（期）: 2006,（11）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1374-1379
• 页数: 6页
• 分类号: R373.33
• 字数: 4960字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-467X.2006.11.010

摘要

背景与目的:人乳头瘤病毒16型(human papillomavirus type 16,HPV16)是宫颈癌组织中最常见的高危HPV,其相应蛋白的血清抗体与宫颈癌的发生发展相关.本研究构建HPV16 E6重组表达载体并表达纯化获得HPV16 E6重组蛋白,用于检测不同人群血清相应抗体,初步探讨本地区HPV16 E6血清抗体反应与宫颈癌的相关性.方法:将HPV16 E6基因与pRSET-A融合表达载体连接,获得E6表达重组体,转化大肠杆菌BL21(DE3)并用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(isopropylthio-β-D-galactoside,IPTG)诱导表达.表达的包涵体变性后经Ni柱纯化,复性并经活性鉴定后,用以包被ELISA板,检测正常女性、慢性宫颈炎患者和宫颈癌患者血清抗体.同时采用荧光偏振方法分型检测宫颈癌组织HPV DNA.结果:pRSET-16E6表达重组体的工程菌经IPTG诱导后可表达Mr 24×103的HPV16 E6组氨酸融合蛋白,表达量占菌体蛋白的22.3%.表达形式为包涵体,重组蛋白纯度达95%以上,其活性经ELISA法证实.80例正常女性、46例慢性宫颈炎和32例宫颈癌患者血清抗体阳性率分别为5.0%、6.5%和31.2%,宫颈癌患者HPV16 E6血清抗体阳性率显著高于正常人(P＜0.002)及慢性宫颈炎患者(P＜0.01),而正常人与慢性宫颈炎患者间的差异无显著性.32例宫颈癌患者癌组织中,HPV DNA阳性率90.6%,HPV16 DNA阳性率46.9%.HPV16 DNA阳性组血清HPV16 E6抗体阳性率(46.7%)高于阴性组(17.6%),但两组间的差异无显著性(P＞0.05).结论:在pRSET-A/BL21中表达获得的HPV16 E6融合蛋白,可用于宫颈癌相关HPV的血清学研究;宫颈癌患者HPV16 E6血清抗体阳性率明显高于正常人和慢性宫颈炎患者.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宋天保	西安交通大学医学院人体解剖与组织胚胎学系	62	461	11.0	18.0
2	阎小君	第四军医大学全军基因诊断技术研究所	56	332	9.0	16.0
3	高艳娥	西安交通大学第二医院妇产科	42	214	8.0	12.0
4	张菊	第四军医大学全军基因诊断技术研究所	79	357	10.0	14.0
5	郭金珠	西安交通大学第二医院妇产科	2	53	2.0	2.0